广州动物园

黑猩猩精液冷冻保存的研究简介

发布时间:2009-02-25

黑猩猩精液冷冻保存的研究简介

  王兴金 黄志宏 黎绘宏   李婉萍
    (广州动物园,广州,510070)

黑猩猩人工授精技术最早见于Hardin等(1974)的报道,美国Toledo动物园采用人工授精方式成功使一只黑猩猩受孕。Matsubayashi等(1985)报道,1981年至1983年间通过人工授精方式先后使2只雌性黑猩猩怀孕3胎。但国内还没有相关报道,在动物园中黑猩猩的繁殖还是依靠自然交配。

2007614从一死亡雄性黑猩猩的附睾中冲洗出精子,采用自行配置的精液冷冻保护液,置液氮中冷冻保存16个月后,于37快速复苏,仍保持较高水平的活力。

将冷冻复苏后的精液用解冻缓冲液洗涤,采用梯度离心方法可以分离纯化到活力较好的精子,同时将死亡精子和其它杂质去除。处理后的精子适于进行宫颈内人工授精。

 

3  精子纵切的透射电镜图,显示精子头、颈、尾中段,及尾主段一部分,×13000

4  头颈部及尾中段纵切,显示线粒体螺旋,×18000倍 

5  尾中段-主段结合部纵切,×18000

6  尾中段横切,×86000

7  尾主段横切,显示9+2结构,×46000

8 黑猩猩冷冻精子在低渗溶液中的形态变化,×600

 

黑猩猩精子由头、颈和尾构成,精子总长46.65μm,尾部全长43.21μm,其中中段长5.08μm、主段长38.13μm。中段最主要的特征是存在线粒体螺旋,线粒体呈螺旋状紧密排列在一起,不留空隙,约有17圈线粒体螺旋;尾部主段的特征是存在纤维鞘,纤维鞘包裹着9束外致密纤维,其内为9束微管,中心是一对中央微管。黑猩猩与其他灵长类的精子相比,其大体结构相似,但在总长及各部分的长度上明显小于猕猴属的动物,但与人类最接近。精子尾中段的长度代表着线粒体的多少,是精子的重要特征。黑猩猩精子尾中段线粒体螺旋数可能是非人灵长类中最少的,明显小于猕猴属种类。

精子膜是一种起限制、保护作用的半通透性生物膜,精子膜的功能完整性是受精过程的一个重要因素,对其功能的评价是评定精子受精力的一种有效的方法。在本实验室条件下,冷冻保存10个月后解冻复苏的黑猩猩精子低渗膨胀率平均为44.2%,说明经冷冻复苏后的黑猩猩精子膜功能完整性较好,精液品质较优。

 

 

致谢:华南农业大学动物科学学院张守全教授、李莉畜牧师、林艳芬同学协助进行电镜检查和低渗试验,特此致谢。